正就读中学的少年迈尔斯(沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音)意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤,随后身体发生奇特的变化。偶然机缘,他目睹了蜘蛛侠(克里斯·派恩 Chris Pine 配音)和犯罪头目金并(列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音)的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙,蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久,来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克(杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音)出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋,并帮助这个帕克返回自己的宇宙,他们闯入金并的老巢。在这一过程中,二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时,来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。
他们合力与恶势力展开斗争……
艾娃·巴亚,热拉尔·朗万,Riadh Belaïche,热雷米·拉厄尔特,加里·勒斯培,蒂博·埃弗拉德,Samir Decazza,克莱门汀·塞拉里耶
温贞菱,丁宁,黄婕菲,雷婕熙,廖钦亮,林敬伦,文雨非
张继聪,杨天宇,马思惠,周家怡,余安安,吴浩康
黄政民,丁海寅,吴达洙,张允柱,吴代焕,金时厚
汤姆·哈勒姆
戴夫·巴蒂斯塔,索菲亚·波多拉,庞·克莱门捷夫,本·金斯利,斯科特·阿金斯,泰瑞·克鲁斯,丹尼尔·伯哈特,马克·扎罗,安东尼娅·德斯普拉特,谢娜·韦斯特,露西·科克,罗非洛·迪格托勒,乔治·索纳,斯科特·亚历山大·杨,德鲁·盖洛韦,József Kovalik Jr.,Mia Rouba M.Kiss,李勋,Péter Sokorai,Odett Elza Négyesi