正就读中学的少年迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）意外被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，随后身体发生奇特的变化。偶然机缘，他目睹了蜘蛛侠（克里斯·派恩 Chris Pine 配音）和犯罪头目金并（列维·施瑞博尔 Liev Schreiber 配音）的战斗。为了阻止金并利用时空对撞机扰乱宇宙，蜘蛛侠最终壮烈牺牲。可未过多久，来自平行宇宙的颓废的彼德·帕克（杰克·约翰逊 Jake M. Johnson 配音）出现在迈尔斯面前。为了阻止金并的阴谋，并帮助这个帕克返回自己的宇宙，他们闯入金并的老巢。在这一过程中，二人遭到章鱼博士和徘徊者的狙击。与此同时，来自其他宇宙的女蜘蛛侠、暗影蜘蛛侠、蜘猪侠、二次元蜘蛛妹相继出现。
他们合力与恶势力展开斗争……
凯特·布兰切特,迈克尔·法斯宾德,雷吉-让·佩吉,玛瑞萨·阿贝拉,娜奥米·哈里斯,皮尔斯·布鲁斯南,汤姆·伯克,奥利·舒卡,萨默·诺克斯,罗斯·卡特,亚历克斯·马格利亚罗,丹尼尔·弗恩,戴恩·朱勒尔
Thomas Khawam,Aurore Planas,Pierre André
本·施瓦茨,金·凯瑞,基努·里维斯,伊德瑞斯·艾尔巴,科琳·欧肖内希,詹姆斯·麦斯登,提卡·森普特,李·马贾道布,克里斯滕·里特,艾莉拉·布朗,亚当·佩里,娜塔莎·罗斯韦尔,谢默·摩尔,汤姆·巴特勒,乔玛·塔科内,索非亚·佩尔纳斯,克里斯托·费尔南德斯,詹姆斯·沃克,布雷特·特雷诺,理查德·萨顿
阿吉特·库玛尔,特丽莎·克里希南,雷吉娜·卡桑德拉
郭度沅,刘在明,周元,李裕英,金敏载,吴代焕,李俊赫
弗兰克·盖思堂彼得,佐伊·马奇尔,Bosh