决定历史命运的鸟羽伏见之战，在维新军的强大攻势下，幕府一方兵败如山倒，纵使心有不甘，云集了诸多高手的新选组也不得不在历史潮流的面前低头，吞下战败的苦果。在某个夜晚，雪村千鹤（桑岛法子 配音）目睹了土方岁三（三木真一郎 配音）被罗刹之血所折磨的痛苦一刻。另一方面，战胜者渐次逼近江户，新选组必须在此之前撤出江户，前往会津。风云突变的紧要关头，土方岁三不辞而别，冲田总司的健康状况已经到了崩溃边缘，而近藤勇（大川透 配音）也传出了即将问斩的消息。
曾经风光一时的新选组，在时代更迭的浪潮中迎来了黯然的落幕时刻……
藤原夏海,古川慎
小樱悦子,春海百乃,加濑康之,梶原岳人,日比优理香,木内秀信,熊谷健太郎,藤井雪代,高桥花林,小西克幸
石川由依,本渡枫,佐藤拓也,天崎滉平,立花慎之介,德井青空,成田剑,中村栞奈,内田秀,兴津和幸,伊藤美纪,大谷育江,大桥贤一郎,伊藤健太郎,大原沙耶香,村上裕哉,村上奈津实,铃木爱奈,诹访奈奈香,东地宏树,坂本真绫
花泽香菜,小野贤章
滨野大辉,堀江瞬,伊东健人,驹田航,土岐隼一,山下诚一郎,增田俊树